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轉(zhuǎn)染試劑
polysciences 23966-1轉(zhuǎn)染試劑
產(chǎn)品型號(hào):
更新時(shí)間:2026-03-24
廠商性質(zhì):代理商
訪問(wèn)量:3758
服務(wù)熱線
產(chǎn)品分類(lèi)
線性聚乙烯亞胺PEI 25K:基因遞送領(lǐng)域的經(jīng)典之選
一、產(chǎn)品概述
在分子生物學(xué)與基因治療研究領(lǐng)域,陽(yáng)離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑因其高效、經(jīng)濟(jì)的特點(diǎn)而備受青睞。其中,polysciences 23966-1轉(zhuǎn)染試劑(即PEI 25K™,線性聚乙烯亞胺,分子量25,000)作為該領(lǐng)域的經(jīng)典產(chǎn)品,自問(wèn)世以來(lái)已被quan-qiu數(shù)千家科研機(jī)構(gòu)廣泛采用。
該產(chǎn)品由美國(guó)Polysciences公司研發(fā)生產(chǎn),該公司成立于1961年,在生命科學(xué)試劑領(lǐng)域擁有超過(guò)60年的技術(shù)積累。PEI 25K™憑借其的zhuo-yue轉(zhuǎn)染效率和可靠的批次穩(wěn)定性,成為HEK293、CHO等常用表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的shou-xuan工具。
二、作用機(jī)制與產(chǎn)品特性
聚乙烯亞胺(Polyethylenimine,PEI)是一種具有高陽(yáng)離子電荷密度的有機(jī)大分子,其分子結(jié)構(gòu)中每相隔兩個(gè)碳原子即存在一個(gè)質(zhì)子化的氨基氮原子,使其在任何pH環(huán)境下都能充當(dāng)有效的"質(zhì)子海綿"(proton sponge)。
當(dāng)用于基因遞送時(shí),PEI通過(guò)靜電作用與帶負(fù)電荷的DNA分子結(jié)合,形成帶正電的納米級(jí)復(fù)合物(polyplex)。這些復(fù)合物能夠黏附于細(xì)胞膜表面的負(fù)電荷殘基,并通過(guò)內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞。進(jìn)入細(xì)胞后,PEI的質(zhì)子化效應(yīng)引發(fā)反離子大量涌入和滲透壓變化,導(dǎo)致內(nèi)體膨脹破裂,從而將DNA釋放至細(xì)胞質(zhì)中,最終進(jìn)入細(xì)胞核實(shí)現(xiàn)基因表達(dá)。
該試劑的主要技術(shù)參數(shù)如下:CAS號(hào)為9002-98-6和26913-06-4,外觀呈白色至黃色固體,熔點(diǎn)73-75°C,可溶于熱水、低pH冷水、甲醇和乙醇,但不溶于苯、yi-mi和丙酮。
三、應(yīng)用優(yōu)勢(shì)與實(shí)驗(yàn)表現(xiàn)
在HEK293和CHO表達(dá)系統(tǒng)中,該試劑展現(xiàn)出從96孔板到100升生物反應(yīng)器的規(guī)模化一致性,能夠穩(wěn)定實(shí)現(xiàn)高水平基因表達(dá)。相較于市場(chǎng)上其他轉(zhuǎn)染方案,實(shí)驗(yàn)室自行配制PEI工作液可將總轉(zhuǎn)染成本降低約40%,這一經(jīng)濟(jì)性?xún)?yōu)勢(shì)使其成為工業(yè)化生產(chǎn)mABs、rABs、bsABs以及病毒載體(AAV、LV、BEV)的理想選擇。
多項(xiàng)研究證實(shí),該產(chǎn)品在多種細(xì)胞系中均表現(xiàn)出優(yōu)異的轉(zhuǎn)染效率。在HEK293T細(xì)胞中,采用DNA與PEI 1:2至1:4的質(zhì)量比進(jìn)行轉(zhuǎn)染,24小時(shí)后即可觀察到目標(biāo)基因的表達(dá),48-72小時(shí)達(dá)到蛋白表達(dá)峰值。對(duì)于病毒包裝應(yīng)用,該試劑能夠支持高滴度慢病毒和腺相關(guān)病毒(AAV)的生產(chǎn)。
四、溶液配制與使用指南
正確的溶液配制是確保轉(zhuǎn)染成功的關(guān)鍵步驟。以下是經(jīng)Polysciences公司驗(yàn)證的標(biāo)準(zhǔn)配制流程:
所需材料:1g線性聚乙烯亞胺粉末、1升Milli-Q®純水或注射用水(WFI)、12M鹽酸、10M氫O化Na、0.1-0.2µm PES真空無(wú)菌過(guò)濾器、無(wú)菌聚乙烯或聚丙烯試劑瓶。
配制步驟:
1. 將約450mL純水倒入1升玻璃燒杯中,加入500mg PEI粉末,使用聚四氟乙烯攪拌棒攪拌;
2. 逐滴加入12M鹽酸,將pH調(diào)節(jié)至2.0以下(約需800µL),持續(xù)攪拌2-3小時(shí)直至wan-quan溶解;
3. 逐滴加入10M氫O化Na中和至pH 7.0(約需500µL);
4. 將溶液轉(zhuǎn)移至量筒,定容至500mL;
5. 使用0.22µm濾膜進(jìn)行過(guò)濾除菌;
6. 分裝后于-20°C保存,工作液可存放于4°C備用。
轉(zhuǎn)染操作建議:
轉(zhuǎn)染前一日將細(xì)胞接種至培養(yǎng)器皿,確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70-90%;
在無(wú)血清培養(yǎng)基中稀釋質(zhì)粒DNA,加入PEI溶液(DNA:PEI質(zhì)量比建議1:2至1:4),輕柔混勻后室溫孵育15分鐘;
將轉(zhuǎn)染復(fù)合物滴加至細(xì)胞培養(yǎng)液中,十字形晃動(dòng)培養(yǎng)板使分布均勻;
轉(zhuǎn)染后16-18小時(shí)更換為wan-quan培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)至收獲。
五、產(chǎn)品定位與選擇建議
在Polysciences的PEI產(chǎn)品線中,PEI 25K™(貨號(hào)23966系列)與升級(jí)產(chǎn)品PEI MAX(貨號(hào)24765,分子量40,000)形成了互補(bǔ)的產(chǎn)品矩陣。PEI 25K™以其成熟的應(yīng)用方案和較高的性?xún)r(jià)比,適用于常規(guī)的瞬時(shí)蛋白表達(dá)和抗體生產(chǎn);而PEI MAX則憑借wan-quan水解的鹽酸鹽形式和更高的水溶性,在病毒包裝等對(duì)細(xì)胞毒性要求更嚴(yán)格的場(chǎng)景中表現(xiàn)更佳。北京百奧創(chuàng)新科技有限公司提供polysciences 23966-1轉(zhuǎn)染試劑,歡迎選購(gòu)!
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