凡知醫(yī)學高保真PCR預混液原理

更新時間：2024-09-03

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一、凡知醫(yī)學高保真PCR預混液目錄表

貨號	產(chǎn)品	規(guī)格
FG2207	高保真PCR預混液	1ml

二、凡知醫(yī)學高保真PCR預混液原理

凡知高保真PCR預混液的原理主要基于PCR技術、高保真DNA聚合酶的使用，以及特定的緩沖體系和添加劑，以確保高特異性和高保真性。

1. PCR技術

聚合酶鏈式反應（PCR）技術，這是一種在體外酶促擴增特定DNA片段的技術，類似于DNA的天然復制過程。PCR技術利用一對與模板DNA兩端互補的寡核苷酸引物，在DNA聚合酶的作用下，沿著模板鏈延伸至完成新的DNA合成，不斷地重復這一過程，使目的DNA片段以指數(shù)級進行擴增。引物與DNA片段的特異結合決定了擴增的特異性。其主要過程由變性、退火和延伸三個步驟反復循環(huán)組成，每循環(huán)一次，雙鏈DNA分子數(shù)量即增加一倍?。

2. 高保真DNA聚合酶

凡知高保真PCR預混液包含Hieff Canace Plus High-Fidelity DNA Polymerase，這是一種具有高保真性的酶，其保真性是Taq DNA聚合酶的83倍，是普通Pfu DNA聚合酶的9倍。這種酶具有5’→3’DNA聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性，后者能夠校正錯誤，從而提高PCR產(chǎn)物的保真性。預混液中還添加了延伸因子，使得該酶具有長片段擴增能力，擴增目的片段的長度可達13 kb。

3. 特定的緩沖體系和添加劑

預混液中添加了常溫可抑制聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性的兩種單克隆抗體，這簡化了實驗步驟，使得高特異性的Hot Start PCR變得簡便易行。凡知醫(yī)學的高保真PCR預混液還可能包含電泳指示染料，使得PCR產(chǎn)物可以直接進行電泳檢測，簡化了實驗步驟，提高了實驗效率。此外，該產(chǎn)品還可能含有特異保護劑，使得預混液在反復凍融后仍能維持穩(wěn)定活性，保證了實驗的可靠性和重復性?。該預混液還具有快速簡便、靈敏度高、特異性強、穩(wěn)定性好等優(yōu)點，反應體系只需加入引物和模板即可，并通過兩步法的程序進行擴增。產(chǎn)品中還含有電泳指示染料，使得PCR產(chǎn)物可直接進行電泳檢測。此外，該產(chǎn)品還含有特異保護劑，使得預混液反復凍融后仍可維持穩(wěn)定活性。